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R&D systems蛋白芯片技术介绍

作者手语:

   某某重点实验室需要做信号通路分析,检测的指标大概有二十几个,做WB分析。与客户一起化了几天的时间查询四五家公司的信号通路抗体才把试剂凑齐了,总共花费人民币四万多。订购之后,发现有几个抗体外商还缺货,货期不定。客户赶实验,太着急了,催货都把我们催疯了。后来我们推荐客户用R&D systems蛋白芯片做个筛,筛选出对他实验研究有影响的信号通路分子后再做进一步的定量(Elisa)分析。订购之后,2周左右就到货了,客户两天内就完成了实验。试验之后客户发现,有好几个信号通路分子在他的实验中就没有多大的影响,就没有必要在做下一步的精细化检测试验了,要是用抗体做WB检测还很难体现出影响的大小。通过R&D systems蛋白芯片分析之后,信号通路影响分子很清楚的。并且省了时间、经费、缺货的烦恼、重复WB的烦闷,实验效果更明确。客户很快就在国外权威期刊发表了实验结果.....

蛋白芯片高通量定量分析试剂盒现在应用越来越广,主要用于药物、细胞因子、抑制剂、病毒作用细胞后细胞因子表达变化的高通量初步筛选与定量检测,比WB的灵敏度高100倍左右;是WB方法和Elisa方法的融合,更有创新,比这两种方法更简单,更有大规模多因子高通量筛选作用。R&D systems蛋白芯片目前主要有:细胞因子高通量检测蛋白芯片,信号通路高通量检测蛋白芯片,细胞凋亡高通量检测蛋白芯片,干细胞高通量检测蛋白芯片等。

蛋白芯片可以测量单一样本中多种蛋白,是一种快捷、敏感、且经济实惠的检测方法。蛋白芯片试剂盒里有缓冲液、检测抗体、和带有捕获抗体的膜,这些捕获抗体经过精心选择,有高度特异性。使用这些蛋白芯片,无需专门的设备,能够取代多种免疫沉淀/Western blot实验。(R&D Systems蛋白芯片产品见后表)

具体介绍如下(由于文本格式的原因,针对R&D Systems蛋白芯片的试验图片以及其他资料没能上传到网页,如有感兴趣的,请联系我们公司索取,E-mail:gsl@akeasci.com):

R&D Systems
Committed to providing a comprehensive line of high quality Tools for Cell Biology ResearchTM
探索蛋白的奥秘,R&D Systems伴您每一步!
第一步:蛋白芯片作为筛选工具来发掘有研究价值的蛋白
    R&D Systems的人细胞因子蛋白芯片(目录号ARY005),利用点在硝酸纤维素膜上的捕捉抗体,能在单一样本中,快速、灵敏地同时检测36种细胞因子、趋化因子和急性时相蛋白。化学发光检测(左图)和计算像素密度直方图(右图)显示的是人外周血单核细胞与PHA共温育24小时后的相关蛋白表达。为便于解释本产品,特选图上所注几个蛋白。欲了解人和小鼠细胞因子蛋白芯片(目录号ARY006)所能检测的细胞因子的完整列表,请访问我们的网站www.RnDSystems.com /go/ ProteomeProfiler.
第二步:用R&D Systems可靠的Quantikine ELISA试剂盒来量化你的结果
人外周血单核细胞中的GRO alpha的含量。PBMC先与PHA温育24小时,再用人CXCL1/GRO alpha Quantikine ELISA试剂盒(目录号 DGR00)检测其CXCL1/GRO alpha水平。
活化T细胞中TNF-alpha和IFN-gamma的表达。从人外周血单核细胞中筛选出的T细胞,经PHA刺激, 再经小鼠抗人CD3单克隆抗体(目录号 MAB100)激活CD3,从而导致TNF-alpha和IFN-gamma的表达升高。人Quantikine ELISA TNF-alpha (目录号DTA00C)和IFN-gamma (目录号DIF50)试剂盒用来定量检测这些细胞因子。
第三步:R&D Systems的抗体和蛋白经过多重筛选 可为多种实验提供更丰富的资源
A: 利用流式细胞仪检测胞内肿瘤坏死因子-alpha(TNF-alpha)。人外周血单核细胞(PBMC)经PMA和伊屋诺霉素钙(calcium ionomycin)处理后,由藻红蛋白(PE)偶联的小鼠抗人TNF-alpha单克隆抗体染色(目录号IC210P;填充柱状图);PE偶联的同型对照(目录号IC002P;空白柱状图)显示了TNF-alpha抗体的特异性。
B: TNF-alpha在人外周血单核细胞的免疫细胞染色(ICC)。抗人TNF-alpha/TNFSF1A多克隆抗体(目录号 AF-210-NA)用于检测人PBMC中的TNF-alpha的表达。细胞先用罗丹明红藕联的抗山羊IgG二抗(红色)染色,再由FluoroNissl绿复染。
 

发布时间:2009/7/27